2 heures analysent le kit du rat ELISA de longueur pour l'essai de surnageants de culture cellulaire de la catalase de rat/CAT

Le haut kit de la spécificité ELISA pour CAT 96 de catalase jaillit

Cat.No E0869Ra

Chaîne standard de courbe : 1ng/ml - 300ng/ml

Sensibilité : 0.52ng/ml

Taille : 96 puits

Stockage : Stockez les réactifs à 2-8°C. pour le stockage de six mois fini se rapportent à la date d'échéance le gardent aux cycles de dégel répétés Avoid de -20°C. Si différents réactifs sont ouverts on lui recommande que le kit soit employé dans un délai de 1 mois.

* ce produit sert pour l'usage de recherches seulement, pas des procédures de diagnostic. Il est recommandent fortement de lire cette instruction entièrement avant emploi.

Précision

La précision d'Intra-analyse (précision dans une analyse) trois échantillons de concentration connue ont été examinées d'un plat pour évaluer la précision d'intra-analyse.

La précision d'Inter-analyse (précision entre les analyses) trois échantillons de concentration connue ont été examinées dans des analyses distinctes pour évaluer la précision d'inter-analyse.

Cv (%) = SD/mean X 100

Intra-analyse : Cv<8>

Inter-analyse : Cv<10>

Utilisation prévue

Ce kit de sandwich est pour la détection quantitative précise de la catalase de rat (également connue sous le nom de CAT) en sérum, plasma, surnageants de culture cellulaire, lysates de cellules, homogénats de tissu.

Réactif fourni

Collection de spécimen

Le sérum permettent au sérum de coaguler pendant 10-20 minutes à la température ambiante. Centrifugeuse à 2000-3000 t/mn pendant 20 minutes.

Le plasma rassemblent le plasma utilisant l'EDTA ou l'héparine comme anticoagulant. Centrifugez les échantillons pendant 15 minutes à 2000-3000 t/mn à 2 - 8°C d'ici 30 minutes de collection.

L'urine se rassemblent par le tube stérile. Centrifugeuse à 2000-3000 t/mn pendant approximativement 20 minutes. En rassemblant le fluide liquide et céphalo-rachidien pleuroperitoneal, suivez svp les procédures mentionnées ci-dessus.

Le surnageant de culture cellulaire se rassemblent par les tubes stériles en examinant sécrétez les composants. Centrifugez à 2000-3000 t/mn pendant approximativement 20 minutes. Rassemblez les supernatants soigneusement. En examinant les composants dans la cellule, employez PBS (pH 7.2-7.4) pour diluer la suspension de cellules à la concentration en cellules d'approximativement 1 million/ml. Endommagez les cellules pendant les cycles gel-dégel répétés pour laisser les composants intérieurs. Centrifugez à 2000-3000 t/mn pendant approximativement 20 minutes.

Tissus de rinçage de tissu dans PBS (pH 7,4) pour enlever le sang excédentaire complètement et à peser avant homogénéisation. Hachez les tissus et homogénéisez-les dans PBS (pH7.4) avec un homogénisateur en verre sur la glace. Dégelez à 2-8°C ou gelez à la centrifugeuse de -20°C. à 2000-3000 t/mn pendant approximativement 20 minutes.

Résumé

1. Préparez tous les réactifs, échantillons et normes.
2. Ajoutez l'échantillon et le réactif d'ELISA dans chacun bien. Incubez pour 1 heure à 37°C.

3. Lavez le plat 5 fois.

4. Ajoutez la solution A et B. Incubate de substrat pendant 10 minutes à 37°C.

5. Ajoutez arrêtent la solution et la couleur se développe.

6. Lisez la valeur d'OD d'ici 10 minutes.

Calcul de résultat

Construisez une courbe standard en traçant l'OD moyen pour chacun standard sur (y) l'axe vertical contre la concentration sur (x) l'axe horizontal et dessinez une courbe de l'ajustement normal par les points sur le graphique. Ces calculs peuvent mieux être exécutés avec le logiciel sur ordinateur de courbe-montage et la ligne de l'ajustement normal peut être déterminée par analyse de régression.

Références

Kim C.H., Choi H., Chun Y.S., Kim G.T., parc J.W., Kim M.S.
Pflugers Arch. 442:519- 525(2001)